动物源性食品中喹诺酮类物质的快速检测 胶体金免疫层析法
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附件6 动物源性食品中喹诺酮类物质的快速检测 胶体金免疫层析法 (KJ201906) 1 范围 本方法规定了动物源性食品中喹诺酮类物质的胶体金免疫层析快速检测方法。 本方法适用于生乳、巴氏杀菌乳、灭菌乳、猪肉、猪肝、猪肾中洛美沙星、培氟沙星、氧氟沙星、诺氟沙星、达氟沙星、二氟沙星、恩诺沙星、环丙沙星、氟甲喹、噁喹酸残留的快速测定。 2 原理 本方法采用竞争抑制免疫层析原理。样品中的喹诺酮类物质与胶体金标记的特异性抗体结合,抑制了抗体和检测线(T线)上抗原的结合,从而导致检测线颜色深浅的变化,通过检测线与控制线(C线)颜色深浅比较,对样品中喹诺酮类物质进行定性判定。 3 试剂和材料 除另有规定外,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T 6682规定的二级水。 3.1 试剂 3.1.1 乙腈。 3.1.2 甲酸。 3.1.3 分散固相萃取剂I:分别称取硫酸镁18 g、醋酸钠4.5 g放于研钵中研碎。 3.1.4 分散固相萃取剂II:分别称取硫酸镁27 g、N-丙基乙二胺(PSA)4.5 g放于研钵中研碎。 3.1.5 甲酸-乙腈溶液:98 mL乙腈中加入2 mL甲酸,混匀。 3.1.6 甲醇。 3.1.7 稀释液:脱脂奶粉︰水(1︰10)。 3.2 参考物质 喹诺酮类参考物质的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子量见表1,纯度≥99%。 表1 喹诺酮类参考物质的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子量 序号 中文名称 英文名称 CAS登录号 分子式 相对分子量 1 洛美沙星 Lomefloxacin 98079-51-7 C17H19F2N3O3 351.35 2 培氟沙星 Pefloxacin 70458-92-3 C17H20FN3O3 333.36 3 氧氟沙星 Ofloxacin 82419-36-1 C18H20FN3O4 361.37 4 诺氟沙星 Norfloxacin 70458-96-7 C16H18FN3O3 319.33 5 达氟沙星 Danofloxacin 112398-08-0 C19H20FN3O3 357.38 6 二氟沙星 Difloxacin 5522-39-4 C28H33N3F2 449.58 7 恩诺沙星 Enrofloxacin 93106-60-6 C19H22FN3O3 359.16 8 环丙沙星 Ciprofloxacin 85721-33-1 C17H18FN3O3 331.13 9 氟甲喹 Flumequine 42835-25-6 C14H12FNO3 261.25 10 噁喹酸 Oxolinic Acid 14698-29-4 C13H11NO5 261.23 注:或等同可溯源物质。 3.3 标准溶液的配制 3.3.1喹诺酮类物质标准储备液(1 mg/mL):分别精密称取喹诺酮