饲料中卡巴氧的测定 高效液相色谱法

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基本信息

标准简介

 ​ 前 言 本标准在参阅了国外文献资料的基础上，采用净化小柱纯化，再用高效液相色谱仪(配紫外检测器)进行测定。 本标准由浙江省农业厅提出并归口。 本标准由浙江省饲料监察所负责起草。 本标准主要起草人：施杏芬、金海丽、宣士荣、张志健、陈勇、朱聪英、周剑萍。 饲料中卡巴氧的测定 高效液相色谱法 1 范围 本标准规定了饲料中卡巴氧的测定--高效液相色谱法。 本标准适用于饲料中卡巴氧的测定。 本标准最低检测浓度为0.5mg/kg。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 14699.1 饲料采样方法 3 方法原理 试样中的卡巴氧先用三氯甲烷+甲醇溶液提取，通过液—液萃取、HLB小柱净化，再用甲醇洗脱。以甲醇+水作为流动相，用高效液相色谱仪(带紫外检测器)测定，外标法定量。 4 试剂和材料 4.1 除特殊说明外，本标准所用试剂均为分析纯，水为三级水，色谱用水为一级水，符合GB/T 6682中用水规定。 4.2 三氯甲烷。 4.3 甲醇(色谱纯)。 4.4 氢氧化钠。 4.5 氯化钠。 4.6 磷酸二氢钾。 4.7 (0.1mol/L氢氧化钠+10%氯化钠)混合液： 称取4.0g NaOH和100gNaCl溶于蒸馏水中，再用蒸馏水定容至1000mL。 4.8 1mol/L磷酸二氢钾溶液：称取136 g KH2PO4溶于蒸馏水中，再用蒸馏水定容至1000mL。 4.9 三氯甲烷+甲醇溶液(V+V)=3+1。 4.10 色谱净化柱：HLB小柱60mg/3mL。 4.11 冰醋酸。 4.12 0.45μm滤膜：有机滤膜。 5 仪器、设备 5.1 实验室常用仪器设备。 5.2 真空泵(0.1Mpa)。 5.3 恒温水浴锅。 5.4 旋转蒸发仪。 5.5 旋涡混合仪。 5.6 超声波提取器。 5.7 高效液相色谱仪(配紫外检测器)。 6 试样的制备 按GB/T 14699.1采样，选取有代表性的饲料样品至少500ｇ，四分法缩减至100ｇ，磨碎，全部通过0.42ｍｍ孔径分析筛，混匀，装入密闭容器中，避光低温保存备用。 7 分析步骤 7.1 条件 检验过程应在避光条件下快速进行。 7.2 提取 准确称取10g(精确至0.001 g)混匀的试样于250mL锥形瓶中，加2 g左右的硅藻土。在锥形瓶中加入100mL左右的三氯甲烷+甲醇溶液(4.8)，常温超声20分钟，冷却至室温。用60mL玻璃砂芯漏斗(孔径为3μｍ)过滤到500mL抽滤瓶中，把抽滤瓶中的滤液倒入另一250mL锥形瓶中；再取40m

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